• 高压细胞破碎仪如何进行细胞破碎
  • 发布日期:2017-01-16浏览次数:996
     高压细胞破碎仪采用电机驱动,而非气动方式,也不使用压缩空气调节均质阀,这避免了空气经压缩产生的水份进入高压泵或均质阀腔体,污染细胞破碎的样品,而导致高压细胞破碎仪无法正常运行。高压细胞破碎仪对酵母细胞、大肠杆菌破碎,一次破碎,细胞破碎率可以达到90%以上,2次或2次以上破碎,细胞破碎率可以达到大约100%,且细胞破碎后释放的蛋白活性好。
    高压细胞破碎仪就是将电能通过换能器转换为声能,这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡,这些小气泡迅速炸裂,产生的象小一样的能量,从而起到破碎细胞等物质的作用的仪器。声波细胞破碎仪工作原理基于超声波在液体中的空化作用,换能器将电能量通过变幅杆在工具头顶部液体中产生高强度剪切力,形成高频的交变水压强,使空腔膨胀、爆炸将细胞击碎。另一方面由于超声波在液体中传播时产生剧烈地扰动作用,使颗粒产生很大的加速度,从而互相碰撞或与器壁互相碰撞而击碎。
    高压细胞破碎仪如何进行细胞破碎:
    1、高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至zui慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。
    2、玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。
    3、超声波处理法:用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。
    4、反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。
    5、化学处理法:有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好。
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